挑战：不精确的药物剂量会导致死亡

全球器官移植活动的增长正驱动对监测免疫抑制药物更精确快速而又经济划算的方法的需求。尽管免疫抑制药物（ISDs）存在  固有的风险，但其广泛使用促进 了每年数以万计的同种异体移植 的移植手术，因此有降低病人发病率和死亡率的巨大的潜力。

窄治疗指数ISD的治疗药物监测 （TDM）是日益受到欢迎的一款工具，可最小化药物毒性，并同时最大限度防止移植物损失和器官排斥。器官移植病人体内定期 精确的TDM是减少与其使用有关 的风险必不可少的步骤，监测内容包括：

• 窄治疗范围的药物疗效极有可能造成病人用药量不足或过量，取决于病人当前的健康状况和治疗阶段，病人也可能会出现个体反应和变异反应；
• 可变的药物动力学意味着，在病人的免疫系统内，在任何给定时间都有ISD可用；
• 如果剂量过高，有潜在的毒性：通过加速动脉粥样硬化、糖尿病、高 血压等疾病伤害其它器官（例如， 肾脏）以及增大对机会性感染和恶 性肿瘤的敏感性
• 安全和法规合规：对于每个个体患 者，必须遵循严格的指导方针

几十年来，免疫测定法一直是所有类型TDM的主要测定方法和技术。然而，免疫测定法伴随着很多缺点，其中包括与代谢物交叉反应，这会导致不精确的药物剂量、假阳性和假阴性，反过来又会 产生可怕的后果，居于导致病人死亡最坏病例之首。
为此，研究人员目前正在用 LC-MS/MS等质谱分析（MS）方法取代免疫测定法，此分析方法比免疫测定法提高了特异度、灵敏度和精确度。  LC-MS/MS快速灵活、适应性强和允许同时量化多个分析 物。测定的药物浓度差异如此微小 （n g / m l ） ， 对成功实施用 LC-MS/MS进行药物监测提出了挑战，包括样品制备的分析前阶段和 HPLC过程本身运行期间。
免疫抑制药物也用于治疗自体免疫疾病。这些药物弱化免疫系统，从而抑制人体内潜在有害的自 体免疫反应的影响。已经用免疫抑 制药物治愈的自体免疫疾病包括， 但不仅限于，牛皮癣、红斑狼疮、 类风湿性关节炎、克罗恩病、多发性硬化症和斑秃。 

五个最常见的处方免疫抑制药物是：环孢霉素A、他克莫司、西 罗莫司（雷帕霉素）、依维莫司和霉酚酸。最近的进展表明，液相色谱一串联质谱分析（LC-MS/MS） 现在已经充分标准化，足以执行一直研究主要ISD的TDM，且现在可以取代免疫测定法。
他克莫司可通过抑制混合淋巴细胞反应和生成细胞毒性T细胞产生体外免疫抑制作用。对通过含量实现的他克莫司血清测量的免疫测定法（ELISA）和LC-MS/  MS方法之 间的一致性的评价的一个令人关注的研究表明， ELISA方法的主体间变异系数高于LC- MS/MS的主体间变异系数，最终结论是，较低的 LC-MS/MS的主体间变异会导致较少的剂量变化和总体改善儿科肾移植病人体内的免疫抑制控制。 与ISD的精确的监测有关的挑战 以样品类型和质量和整个LC-MS/MS过程期间讨论药物的相 对稳定性。

特别是，在样品制备过程中使 用的水必须超纯：非病人样品中固有的任何细菌或离子都可能摧毁其完整性， 从而导致结果扭曲和假阳性或假阴性和不精确的配量1。鲜血可能是用于ISD分析的最常见的样 品类型，因为鲜血是十分重要的某一特定ISD的实际循环浓度：即鲜血的生物利用度。然而，最近利用干燥的血斑点进行的研究表明，鲜血也能用作一个样品类型，用于在 LC-MS/MS前面监测ISDs。 然而无论哪种样品类型，研究人员和QA科学家都要在一个极窄的 治疗范围内频繁应付 ISD 的临界 量。 为了充分解决这一挑战，在制备病人TDM样品和MS前面的HPLC分析中使用的水必须超纯，以避免可能被误认为是活性药物成分的鬼峰值等产生的问题。

解决方案： 确保您TDM化验的超纯水供应

实际上， 一个含有标准化审计可追踪成分，足够纯的水必须用于这些临床化验，比如由一个内部水净化系统提供的纯水。  由一个不可靠的水源引入的可变性越低，则开发的LC-MS/MSTDM化验就越有可能全局标准化和再现，而FDA等相应组织也因此更愿意批准此方法。
此整个工作流程标准化的深远影响是，更多的样品和更多的病人数据能有意地合并和比较和 能够精简试验，其中包括HPLC和 LC-MS中使用的水质量的标准化。这必将最终导致更成功的病人治疗效果和对全世界的人类医疗保健事业做出巨大贡献。